А Б В Г Д Е Ё Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Ч Ш Щ Ы Э Ю Я 
 
 A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z 
Набор диагностический для определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови по методу Райтмана-Френкеля
Назначение: Количественное определение динитрофенилгидразиновым методом.
Рейтинг:     
Проголосовать >>
Добавить отзыв >>
X
Как вы оцениваете "Набор диагностический для определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови по методу Райтмана-Френкеля".
  •     Не помогает
  •     Плохо помогает
  •     Помогает
  •     Хорошо помогает
  •     Отлично помогает
СкрытьПоказания
Количественное определение динитрофенилгидразиновым методом.
СкрытьОсобые указания
Общие правила безопасной работы с образцами крови; общие правила работы с ядовитыми (2,4-динитрофенилгидразин) и едкими (гидроокись натрия) веществами.



СкрытьФармакологическая группа
диагностическое средство
СкрытьСостав
Состав набора

Реагент 1. Субстратно-буферный раствор - по 100мл, 2 флакона.
Реагент 2. 2,4-Динитрофенилгидразин, 1,0 ммоль/л, в кислоте соляной, 1,0 моль/л - по 100 мл, 2 флакона.
Реагент 3. Натрия гидроокись, 8,0 моль/л - 100 мл, 1 флакон.
Калибратор. Калибровочный раствор натрия пировинограднокислого, 2,0 ммоль/л, в кислоте бензойной, 16,4 ммоль/л - 5,0 мл, 1 флакон
СкрытьФармакологическая группа по АТК
V04CX. Диагностические препараты прочие
СкрытьМетоды применения и принцип действия
Принцип метода В результате реакции переаминирования между L -аспартатом и альфа-кетоглутаровой кислотой под действием АсАТ образуются щавелевоуксусная и глутаминовая кислоты. Щавелевоуксусная кислота в процессе реакции превращается в пировиноградную кислоту. При добавлении 2,4-динитрофенилгидразина в щелочной среде образуется окрашенный гидразон пировиноградной кислоты, интенсивность окраски которого пропорциональна активности АсАТ и определяется фотометрически при длине волны 500 (500-560) нм.
Аналитические характеристики

Линейность в диапазоне 4-68 Е/л, отклонение от линейности не более 10%.
Чувствительность - не более 3,0 Е/л.
Коэффициент вариации - не более 10 %
Нормальные величины
4-12 Е/л
Рекомендуется в каждой лаборатории определить диапазон нормальных величин для обследуемого контингента.
Подготовка реагентов для анализа

Реагент 1 готов к применению.
Реагент 2 готов к применению.
Реагент 3. В мерную колбу вместимостью 2л внести содержимое флакона с реагентом 3 и довести объем раствора до метки водой дистиллированной, не содержащей углекислоту.
Приготовленный раствор перенести в полиэтиленовый флакон. Рабочий раствор реагента 3 можно хранить в плотно закрытом полиэтиленовом флаконе при комнатной температуре не более 6 мес.
Калибратор готов к применению.
ПОСТРОЕНИЕ КАЛИБРОВОЧНОГО ГРАФИКА
В 7 пробирок внести реагент 1, калибратор и воду дистиллированную в соответствии с таблицей (см. дополнительную информацию)..
Содержимое пробирок тщательно перемешать, добавить по 0,5 мл реагента 2, тщательно перемешать путем встряхивания и выдержать при комнатной температуре в течение 20 минут, после чего добавить в каждую пробирку по 5,0 мл рабочего раствора реагента 3, перемешать и выдержать при комнатной температуре в течение 10 минут. Измерить оптическую плотность проб против дистиллированной воды при длине волны 500 (500-560) нм в кювете с длиной оптического пути 1 см.
Калибровочный график построить, откладывая по оси ординат разность оптических плотностей опытных (пробирки №№1-6) и контрольной (холостой) проб (пробирка № 7), а по оси абсцисс - соответствующие им значения активности АсАТ, указанные в таблице.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Компоненты и анализируемые пробы отмерить в количествах, указанных в таблице (см. дополнительную информацию)..
Содержимое пробирок тщательно перемешать путем встряхивания, выдержать при комнатной температуре в течение 10 минут и измерить оптическую плотность опытной и контрольной (холостой) проб против дистиллированной воды при длине волны 500 (500-560) в кювете с длиной оптического пути 1 см. Окраска растворов стабильна в течение 30 минут.
Примечание . В сыворотке (плазме) крови больных диабетом содержится повышенное количество кетовеществ. В таких случаях контрольную (холостую) пробу готовят с сывороткой, которую добавляют в пробу после внесения реагента 2.

Расчеты
Активность АсАТ определить по калибровочному графику. Для этого на оси ординат отметить разность оптических плотностей опытной и контрольной (холостой) проб, а на оси абсцисс найти соответствующее ей значение активности АсАТ.
Для перевода активности АсАТ, выраженной в Е/л, в ммоль/(чхл) и мккат/л, необходимо найденное по калибровочному графику значение активности разделить на коэффициенты 16,67 и 60,68 соответственно.